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Nike Blazer Basse Grigie stato ridotto a un decimo di

Nike Blazer Basse Grigie

Durante il montaggio testa del fago T3, il Nike Blazer Basse Grigie DNA è confezionato in un involucro proteico preformato, chiamato prohead, con l'aiuto di proteine ​​di imballaggio non capside, i prodotti di genes18and19 (gp18 e gp19). Abbiamo sviluppato un sistema che definisce, composto purificato gp18, gp19 e proheads Forin vitropackaging del DNA T3. I nostri risultati precedenti utilizzando il definedin vitrosystem indicano gli eventi in sequenza nella confezione del DNA: le proteine ​​di imballaggio, gp18 e gp19, legano il DNA e proheads, resepectively. Questi complessi associano per formare un complesso precursori diretti di traslocazione del DNA nella testa. La formazione dei complessi precursori richiede ATP come un effettore allosterico. La successiva traslocazione del DNA è guidato da idrolisi dell'ATP. gp19 è una proteina di legame dell'ATP che svolge molteplici ruoli nel packaging del DNA attraverso l'interazione con l'ATP. gp19 cambia la sua conformazione legandosi all'ATP, come giudicato dalla analisi della proteolisi limitata. Siti spaccati di proteolisi limitata sono stati determinati e mappati sui (residui di aminoacidi 586) polipeptide gp19 per l'immagine del cambiamento conformazionale della gp19 indotta da ATP. Frammenti C-terminali generati da tripsina digestione legati alla prohead e confezionamento di DNA inibito da gp19 intatto in modo competitivo. D'altra parte, i frammenti N-terminali non vincolano il prohead né hanno inibiscono imballaggio DNA. Questi risultati definiscono un dominio di legame al C-terminale di gp19 prohead. Per identificare il dominio di legame prohead più precisamente, mutanti di delezione privi (rispettivamente gp19-ΔC10 e gp19-ΔC15,) gli ultimi 10 e 15 aminoacidi del terminale C estremo di gp19 sono stati costruiti. Modelli di digestione triptici limitate di queste proteine ​​reciproche in presenza o assenza di ATP sono sostanzialmente gli stessi di quelli della gp19-wt, indicando che la conformazione e la sua risposta ATP non sono state modificate queste delezioni. gp19-ΔC15 mancava prohead attività di legame e, quindi, il DNA attività di confezionamento. gp19-ΔC10 ha avuto una significativa attività di confezionamento di DNA anche se è stato ridotto a un decimo di quello di gp19-WT. Questi risultati indicano che la regione C-terminale dei residui Nike Blazer High Vintage Prezzo L571 alla D576 di gp19 è fondamentale per il legame prohead e che gli ultimi dieci residui D577 alla W586 del terminale C sembra essere importante in stabile vincolante della gp19 al prohead.
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